题干
玉米籽粒胚乳的粉质与硬质是具有重要农艺价值的一对相对性状。我国科学家在对玉米粉质品系A和硬质品系W两个纯合品系的研究中,发现等位基因VA和VW可能参与该性状的调控。进一步研究发现,这对基因的序列长度存在差异(图a),且在胚乳发育过程中VA的表达量显著低于VW的表达量。为明确这对基因参与性状调控的机制,开展如下研究。 回答下列问题: (1)将两个品系进行正反交,获得的F1籽粒胚乳均表现为硬质,可知硬质为__________性状。 (2)根据这对基因的序列设计了3种引物(图a),便于通过PCR技术进行区分。PCR反应体系中包括这3种引物、Taq DNA聚合酶(延伸速度约为1000 bp/min)、缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核苷酸和__________,反应参数见图b。预测品系W植株PCR产物电泳结果符合①~⑤(图c)中泳道_______________的带型。 (3)基于品系W构建了针对VW基因的RNAi(可通过切割靶基因mRNA显著降低其表达)转基因植株。鉴定转基因植株中VW基因表达是否受到影响,应提取植株_______________进行PCR检测。若VW基因参与调控玉米胚乳性状,预测可得到下列结果(胚乳由极核和精子结合后发育而成,极核和卵细胞携带的基因相同): ①纯合转基因植株的籽粒胚乳性状为_________________; ②杂合转基因植株自交产生的籽粒胚乳性状及比例为____________________________。 (4)已知VW基因编码一种酶,在胚乳发育过程中催化非极性胡萝卜素转化为下游产物。研究人员据此对胚乳性状的产生提出了一个假设,并设计研究思路:对品系A植株进行诱变,筛选胚乳变为硬质的突变体,进而分析其中是否有非极性胡萝卜素合成途径的基因发生突变。推测研究人员提出的假设。最合理的是:_____________________________________是产生品系A粉质胚乳的原因。
答案
(1)显性 (3) ①. (胚乳的)RNA ②. 粉质 ③. 粉质:硬质=3:1 (4)VA基因表达量低,编码的催化酶合成不足,无法有效催化非极性胡萝卜素转化为下游产物;非极性胡萝卜素积累,导致形成粉质胚乳
解析
粉质品系 A、硬质品系 W 为纯合品系,正反交F1籽粒胚乳全为硬质,说明硬质性状能完全掩盖粉质,硬质为显性性状。 PCR反应体系除引物、Taq酶、缓冲液、脱氧核苷酸、水外,还需要模板DNA作为扩增的模板。品系W是纯合VWVW,Taq DNA聚合酶延伸速度约为1000 bp/min,引物1与引物2可扩增出100+196=296bp(约300bp)的片段,引物3延伸的子链至多延伸500bp,不能再作为引物1结合的模板,因此扩增产物对应图c的泳道①。 要检测VW的表达是否受影响,需要检测转录产物,因此提取胚乳的RNA,通过逆转录PCR检测。 已知VW高表达对应硬质,低表达对应粉质。 ①纯合转基因植株的VW表达被RNAi显著降低,因此胚乳性状为粉质。 ②杂合转基因植株(V+V−,V+为正常VW,V−为表达被敲低的VW)自交,胚乳由两个基因型相同的极核+一个精子发育而来,仅纯合的VWVW表现为硬质,杂合转基因植株中VW表达被敲低,因此性状比例为粉质:硬质=3:1。 据题干信息可知,VW编码的酶催化非极性胡萝卜素转化为下游产物,品系A的VA表达量低,酶量不足,因此推测:非极性胡萝卜素积累是产生品系A粉质胚乳的原因,若诱变后非极性胡萝卜素合成途径基因突变,非极性胡萝卜素合成减少不再积累,胚乳会变为硬质。